Объекты и методы исследования

Учебные материалы по биологии / Эколого-физиологические особенности доминирующей водоросли литоральной зоны озера Байкал / Объекты и методы исследования

Страница 2

Для выделения нитей U. zonata использовали пипеточный метод: при малых увеличениях светового микроскопа (× 10-20) с помощью стерильной пипетки Пастера с тонко оттянутым длинным концом отлавливали единичные клетки или нити. Водоросли, отловленные благодаря всасывающей силе капилляра, переносили из одной капли стерильного питательного раствора в другую, пока в капле не оставалась искомая водоросль с максимальным отсутствием посторонних видов, после чего чашки Петри выставляли на естественный рассеянный свет при комнатной температуре [12].

Обработка материала

. Идентификацию, изучение особенностей морфологии водорослей проводили с использованием светового микроскопа MEIJI TECHNO CO. LTD. при увеличениях ×100 и ×400. Результаты исследований документировали с использованием фотоаппарата Olympus C-3040 zoom (3.3Mgpxl) с фотонасадкой NY 2000S 01705.

Для определения биомассы использовали весы Iuchi Sefi (IB-200H) (Япония) и Adventurer Ohaus AR 2140 (Китай).

Для сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) материал дегидратировали в растворах этилового спирта возрастающей концентрации. Полное высушивание препаратов проводили при температуре 40º С, после чего наносили на столики для СЭМ и напыляли золотом (напыление проводилось в приборе SCD-004 (Balzers). Столики с образцами исследовали в сканирующем электронном микроскопе FEI Company Quanta 200 в режиме высокого вакуума.

Экспресс-оценка влияния нефтезагрязнения

. Оценку влияния загрязнения водоема нефтепродуктами на морфометрические показатели U. zonata проводили на основе сравнения популяций из р. Ангара, р. Олха и оз. Байкал. Во всех трех водоемах камни с обрастаниями брали на глубине примерно 0,5 м. При микроскопировании исследовали особенности морфологии клеток в талломах. Методика учета тератогенных особей заключалась в следующем: в 200 случайных полях зрений считали общее количество клеток и количество аномальных клеток, определяли их процентное соотношение.

Статистическая обработка экспериментальных данных.

При статистической обработке экспериментальных выборок использовали стандартные компьютерные программы ("МатЛаб", "Статистика", а также встроенные в "Excel" и графический редактор "Graf4Win"). Высчитывались среднее арифметическое значение и несмещённое среднеквадратичное отклонение, которые использовались как оценочные для матожидания и дисперсии генеральной совокупности [5]. Далее устанавливалось, какому из канонических распределений в наибольшей степени соответствует данная выборка. Доверительный интервал вычислялся, исходя из 95%-ого уровня доверия, по формуле

d = ± 1.96sn-1,

где sn-1 - несмещённое среднеквадратичное отклонение.

Ошибка среднего значения находилась по формуле [5, стр. 36-37]:

где d0 - ошибка единичного измерения ,

dn - ошибка среднего серии измерений,

n - число измерений (объём выборки).

Результаты и обсуждение