Измерение рентгенограмм рассеяния от анализируемых образцовУчебные материалы по биологии / Использование дифракционных методов для анализа структуры, фракционного состава и равновесных взаимодействий биологических макромолекул / Измерение рентгенограмм рассеяния от анализируемых образцов
Измерения малоугловых рентгенограмм проводили на дифрактометре фирмы Siemens (Германия) методом пошагового сканирования с использованием гониометра и рентгеновского сцинтилляционного детектора [14]. Малоугловые рентгенограммы измеряли в угловом диапазоне: h = 0.013 - 0.22 А-1, где h = 4 ∙ π ∙ sin(Θ)/λ; 2Θ - угол рассеяния. Для измерения рентгеновского рассеяния использовалась кювета из кварцевого капилляра диаметром 0.65 мм и с толщиной стенок 0.01 мм, установленная в металлическую оправу. Длина волны используемого излучения λ = 1.54 А, температура образцов при измерении рентгенограмм 20оС. Непосредственное измерение рентгенограмм МУРР проведено в.н.с. ГНЦ ВБ «Вектор» Тузиковым Ф.В., имеющим соответствующие допуски работы с рентгеновским оборудованием. В рентгенограммы вносились поправки на фоновое рассеяние, поглощение, коллимацию, проводилось сглаживание. Первичная математическая обработка экспериментальных данных МУРР и вычисление функций распределения сферических частиц по размерам выполнялись на ЭВМ PC по алгоритмам, описанным в [14], а также с использованием процедур оптимизации.
На рис. 3 приведена общая схема дифрактометров, в частности, малоуглового дифрактометра.
Рис. 3. Общая схема дифрактометров.
1 - источник излучения (рентгеновская трубка, лазерный источник) с коллиматором; 2 - анализируемый образец; 3 - падающий пучок излучения; 4 - рассеянное рентгеновское или световое излучение, вызванное образцом 2; 5 - приемная щель; 6 - рентгеновский или световой детектор (приёмник рассеянного излучения)
Чтобы исключить рассеяние рентгеновских лучей другими (кроме ЛП) белками крови, в анализируемые образцы плазмы предварительно вводили нейтральное (для структуры биополимеров) рентгеноконтрастное вещество - NaNO3, создавая плотность, равную средней плотности гидратированных белков. Плотность растворителей в образцах обеспечивали с помощью формулы [16-20]: m = V ∙ (ρ0 - ρс) ∙ ρк/(ρк - ρ0), где V, ρ0 - объем и требуемая конечная плотность растворителя в образце (в сыворотке, плазме и контрольном буфере); ρс - исходная плотность жидкого образца; m, ρк - масса и плотность используемого сухого вещества-контрастера. Плотность растворителей контролировали пикнометрически. В сыворотках крови учитывали их разбавление за счет объема вещества сухого контрастера и вводили соответствующие поправки на концентрацию.
Смотрите также
Получение внеклеточных полисахаридов
Введение
Наряду с белками и нуклеиновыми кислотами, полисахариды -
широко распространённый класс биополимеров, представители которого обнаруживаются
в тканях всех живых организмов и в ...
Влияние Солнца на жизнь Земли
Введение
Последние десятилетия характеризуются необычайно быстрым ростом знаний о
Вселенной и космических объектах. Этот рост вызван как развитием новых
возможностей наблюдения, так и ...
Проблемы моделирования трехмерной структуры белков. Методы их решения
ВВЕДЕНИЕ
Белки - универсальные биополимеры, из которых строится жизнь, - выполняют
весь спектр биологических функций: от структурной до каталитической. Именно
белки играют максимум ро ...